孙志强

云南德宏州食品药品检验所，云南芒市 678400)

摘要：目的：寻求一种相对简易的柳酸毒扁豆碱的含量测定方法。方法：查阅国内文献，查到一种未公开发表，可用，而又相对简易的铋量法。结果：经实验，铋量法是一种相对简易而又可行的方法。结论：铋量法是一种可用于药房制剂和制药企业中间体控制质量的方法。

关键词：铋量法；柳酸毒扁豆碱；含量测定

毒扁豆碱是从产自西非毒扁豆种子中提出的一种生物碱，现已能人工合成。具有抗胆碱酯酶的作用，并可透过血脑屏障，表现中枢兴奋作用，此作用临床用于中药麻醉的催醒。由于吸收后其选择作用低，毒性大，故主要用于滴眼，可使瞳孔缩小，眼压降低。对眼的作用较毛果芸香碱强而持久，可维持12小时。主要用于原发性青光眼、急性青光眼及验光后对抗扩瞳药的作用。其主要制剂有滴眼液、眼膏和注射液。0.25%溶液或眼膏眼用,日1～2次.静注:2～4mg[1]。

柳酸毒扁豆碱滴眼液的含量测定，由于处方中含有硼酸和抗坏血酸，为消除其干扰，各种制剂手册多采用不同操用方法的碱量法。但这些方法都存在一定的问题，如用碱标准液直接测定，酚酞变色时，硼酸的一部分被中和成偏硼酸使含量偏高。含抗坏血酸的处方用碱滴定，则是明显的错误。含硼酸的处方加甘油后变成可滴定的酸，然后测碱的总消耗量的方法，因硼酸含量高，分子量又小，它的含量的小变动，可很大程度掩盖主药的不足或过高。为消除处方中的维生素C、尼洎金乙酯等的干扰还有采用正交函数法、双波长分光光度法、高压液相法等，这些方法有需要一定的设备，不快速等问题。为此，我们参考文献[2]记载的铋量法，经实验结果是可行的，现介绍如下。

  1,测定法的原理：本方法是利用铋盐的生物碱的沉淀作用。于毒扁豆碱的溶液中，加入过量的铋盐溶液(四碘铋钾)，铋盐和毒扁豆碱结合而发生沉淀，多余的铋用EDTA滴定，同时作空白试验，即可算出毒扁豆碱的含量。反应式如下：

                     ↗COOH                             ↗COOH

         C15H21N3O2•C6H4       ＋ KBiJ4→C15H21N3O2•HBiJ4＋C6H4

                     ↘OH                               ↘OH

Bi3+ +  H2Y2-  →BiY-  +  2H+

  2，试药和试剂

  2,1柳酸毒扁豆碱(进口分装,B.P.88版规格)

  2,2 EDTA标准液的配制和标定:称取0.25g于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌,称准至0.0001g。用少量水湿润，加2ml20%盐酸至溶解，加100ml水，用10%氨水至PH7～8，加10ml氨-氯化氨缓冲液（PH10），加5滴0.5%铬黑T指示液,用配制好的乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至由紫色变为纯兰色。同时作空白试验，并计算浓度即得。

  2,3 0.05M硝酸铋醋酸溶液的制备和标定:

  取24.26g硝酸铋置1000ml容量瓶中,在搅拌下溶解于300ml冰醋酸和200ml水的混合物中(可在水浴上加温溶解),用水添加到刻度,混匀即得.

  精密吸取20ml0.05M硝酸铋溶液,添加100ml水,二甲基酚橙指示液7～8,用0.05M EDTA标准液滴定至黄色,根椐所消耗的EDTA标准液计算浓度。滴定液在室温下滴定度可保持一年。

  2.4 其他试液按中国药典(2010版)方法配制。

  2.5柳酸毒扁豆碱滴眼液的配制:

处方:柳酸毒扁豆碱5.0g 焦亚硫酸钠0.6g 硼酸16g  注射用水加至1000ml。取硼酸加入适量的注射用水加热溶解，冷后加入焦亚硫酸钠，然后将柳酸毒扁豆碱溶解于其中，加水至全量即得[3]。

3，测定方法 精密吸取0.05M硝酸铋溶液20ml,10%碘化钾液20ml，在搅拌下加入0.25～0.5%柳酸毒扁豆碱滴眼液20ml,一分钟后用干燥滤纸过滤,精密吸取滤液20ml置烧瓶中,添加水50～70ml,用二甲酚橙指示液7～8滴,用0.05MEDTA滴定至黄色,同时进行空白试验.1ml0.05MEDTA相当于0.020675g柳酸毒扁豆碱。

4,回收率测定：精密称取于100℃干燥的柳酸毒扁豆碱，配成含0.5%柳酸毒扁豆碱及1.8%硼酸溶液,精密量取5份,按上述方法测定回收率,结果回收率为101.2%,RSD=0.84

5,本法与碱量法实例比较 取试药和试剂项下,配制的柳酸毒扁豆碱滴眼液20ml,分别按本法和碱量法[4]测定,本法平均含量为标示量的101.8(RSD=1.24),碱量法平均含量为标示量的确良111.8%(RSD=2.14)。

6，讨论：

6.1本法的操作虽比碱量法稍烦,但仍是一种适合药房和生产企业用于控制含量及中间体的一种简便容量法。由于硼酸和抗坏血酸的干扰，碱量法不能准确反映制剂的质量情况，而本法的准确度比碱量法较好。

6.2本法用于快速分析,可取0.05M硝酸铋、10%碘化钾和样品各2ml，按上述测定方法操作，最后取滤液3ml，用0.01M的EDTA进行滴定。对于眼膏，可取样品2g，加水5ml，在水浴上加热搅拌提取，冷却后，取提取液2ml进行滴定。

6.3碱量法测定水杨酸毒扁豆碱[4]的反应式如下:

C15H21O2N3•C6H4OH-COOH + NaOH → C15H¬21O2N3 +C6H4OH-COONa+H2O

6.4碱量法测水杨酸毒扁豆碱滴眼液时,处方中的硼酸和氢氧化钠可以产生偏硼酸和水，干扰测定，反应[5]:如下：

4H3BO3 + 4NaOH →4NaBO2 + 2H2O

6.5 铋量法测滴眼液中毒扁豆碱含量,在国内文献中尚未见报道。

参考文献：

1,《中国药物大全》编辑委员会编.中国药物大全(西药卷),北京:人民卫生出版社,1998:9

2,云南省庆祝中国药学会成立80周年大会学术论文集第十四集6页.铋量法测柳酸毒扁豆碱含量(方子年译自:Е.В.Вичхарева. висмутометрическое определение физостигмина салицилата ,ФармацияⅩⅩⅩⅣ:42)

3,四川医学院附属医院药剂科.制剂手册,1981:308

4,昆明军区后勤卫生部.医院药剂与检验,1985:359

5.陈寿椿,唐春元,于肇德编.重要无机化学反应,上海科学枝术出版社,1994;1466