张丽君

南阳医专一附院妇科 河南南阳 473000

【摘要】 目的 建立小鼠模型并探讨TCDD对小鼠内膜组织中细胞色素芳香化酶P450（P450arom）表达的影响。方法 建立小鼠模型，采用TCDD 0、3、10μg/kg对小鼠进行宫内、外暴露或宫内宫外联合暴露，从而将小鼠模型分为五个组：0-0组，3-0组，0-3组，3-3组和3-10组，每组各有24只小鼠。采用免疫组织化学法检测小鼠模型中子宫内膜组织中P450arom的表达水平。结果 P450arom在小鼠暴露组的表达高于对照组（P<0.05），并随TCDD暴露剂量的增加而升高（P<0.05）；结论 TCDD可以促进子宫内膜中P450arom的表达。

【关键词】 TCDD；小鼠模型；P450arom

TCDD即四氯二苯并二恶英是一种常见的环境污染物，广泛存在于人类生存环境中，严重威胁人的身体健康。证据表明TCDD与妇科雌激素依赖性疾病的发病关系密切[1]，P450arom是雌激素合成的限速酶，在多种疾病中以合成雌激素而发挥重要作用。本研究建立小鼠模型，使用不同剂量TCDD对其进行宫内、外暴露或联合暴露，检测子宫内膜组织中P450arom表达程度，以探讨TCDD对其表达的影响。

       材料和方法

1.动物建模  参考Audrey M. CummingsTCDD实验模式建模[2]。将60只SPF级C57BL/6雌鼠和30只SPF级C3H雄鼠在成熟期以2:1合笼，将怀孕后的雌鼠随机分为TCDD暴露组40只和对照组20只。在妊娠第8天通过灌胃强饲给予暴露组TCDD3ug/kg，母鼠产后共选择雌性子鼠120只：在原对照组中选择48只，分为0ug/kg和3ug/kg组。在原暴露组中选择72只，分为0ug/kg、3ug/kg和10ug/kg组。根据小鼠TCDD暴露时间及暴露剂量的不同将其分为5组，0-0组，3-0组，0-3组，3-3组，3-10组，每组含24只子鼠。在子鼠出生后第21天和49天给予0-3组，3-3组，3-10组TCDD各3ug/kg，3ug/kg，10ug/kg，出生后第70天全部处死，取其子宫内膜固定备用

2.使用免疫组织化学方法进行检测  

3.免疫组化结果判断  染色结果通过相关分析处理，以平均光密度计算P450arom表达情况。

4.统计学分析 应用SPSS13.0软件进行统计分析，结果用x±s 表示，P<0.05具有显著性差异。

结  果

P450arom蛋白位于暴露组小鼠子宫内膜腺上皮细胞的胞浆内。0-0组小鼠内膜中没有P450arom表达，余各组均有表达，3-0组（0.1464±0.0338），0-3组（0.1756±0.0472），3-3组（0.2345±0.0546），3-10组为（0.2794±0.0330），其表达按照0-0组，3-0组，0-3组，3-3组，3-10组的顺序依次升高，任两组之间差异均具有显著性（P<0.05）。

    讨  论

TCDD主要产生于化工生产、汽车尾气及城市废弃物中，通过多种途径进入人体危害人体健康。研究表明子宫内膜不仅受到血液循环中雌激素的影响，还通过自分泌或旁分泌的方式产生雌激素，使局部雌激素分泌过多，为雌激素依赖性疾病的发生创造了条件。P450arom是雌激素合成的限速酶，对雌激素的产生影响较大。本研究对小鼠子宫内膜的检测中发现，P450arom表达量按0-0组，3-0组，0-3组，3-3组和3-10组的顺序依次升高。0-0组没有P450arom蛋白表达，3-0组小鼠即母体妊娠期暴露在TCDD中，其子代小鼠内膜中开始出现P450arom表达，说明妊娠期暴露促进子代内膜中雌激素的分泌，导致子代患雌激素依赖性疾病的风险增加。3-3组小鼠和3-0组相比，子代TCDD暴露增加，P450arom表达量也增加。说明P450arom表达随TCDD暴露时间延长而增加，同时也说明宫内宫外联合暴露比单一宫内暴露更能促进P450arom的表达。同样，3-3组小鼠和0-3组相比多了一次宫内暴露，内膜中P450arom表达量也增多，说明TCDD宫内宫外联合暴露比单一宫外暴露更加促进P450arom的表达，也使子宫内膜局部雌激素合成增加，患病风险也更大。在3-10组中，TCDD暴露次数和3-3组相同，但剂量增大，内膜中P450arom表达量也更大，说明P450arom表达量随TCDD剂量增加而增加，使雌激素分泌进一步增加，患病风险也更大。Boverhof 等[3]的研究也表明TCDD可产生一种类似雌激素的作用。

TCDD是二恶英类化合物中毒性最强的一种，流行病学调查显示，长期暴露在TCDD中可以增加人体的患病率及死亡率[4]。我们应积极采取措施来防范其对人体的危害，如提倡垃圾分类收集和处理，控制垃圾焚烧，降低TCDD类化合物的排放量，以减少TCDD所引起的相关疾病的发生。

 

参 考 文 献

1.  张丽君，黄向华，四氯二苯并二恶英与妇科疾病[J].国际生殖健康/计划生育杂志，2011.30（2）：134-137

2  audrey m. cummings, joan m ,hedge ,Linda s .birnbaum  et al. effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.toxicological sciences.1999,52:45-49

3. Boverhof DR，Kwekel JC，Humes DG，et al. Dioxin induces  anestrogen-like，estrogen receptor-dependent gene expression response in the murine uterus [J]. Mol Pharmacol，2006，69（5）：1599-1606.

4  Dario Consonni1,2, Angela C. Pesatori1,2, Carlo Zocchetti，et al. Mortality in a Population Exposed to Dioxin after the Seveso, Italy, Accident in 1976: 25 Years of Follow-Up. Am J Epidemiol. 2008 Apr 1;167(7):847-58.